針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,各霉菌培養(yǎng)箱微生物的控制方式和效果不盡相同,對于細胞來說,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!
培養(yǎng)箱微生物污染的原因:
1,取放細胞時引起的污染
細胞培養(yǎng)過程中,取放細胞是最基本的操作,培養(yǎng)房開關(guān)門的瞬間,環(huán)境中的微生物或多或少會進入培養(yǎng)箱中,而且內(nèi)外溫差導(dǎo)致內(nèi)門冷凝水的產(chǎn)生,極易吸附微生物,都是造成培養(yǎng)箱污染的風(fēng)險因素。
2,滅菌不*造成的二次污染
細胞培養(yǎng)過程中,因其它操作問題(如培養(yǎng)基潑灑,水盤污染等),造成培養(yǎng)房的大規(guī)模污染也時常會發(fā)生,此時就需要對培養(yǎng)箱進行滅菌消毒,常規(guī)的消毒(如紫外照射)只能達到表面消毒的效果,特別是對真菌等頑固性污染,無法進行*滅菌,導(dǎo)致后續(xù)培養(yǎng)過程中細胞污染頻發(fā)。
如何有效避免污染?
1.重視細胞房管理工作,規(guī)范操作
定期進行細胞房清潔消毒工作,規(guī)范實驗人員操作(如身著白大褂、換鞋等),創(chuàng)造潔凈培養(yǎng)環(huán)境。
2.避免頻繁查看細胞
做好實驗規(guī)劃,減少培養(yǎng)箱門開關(guān)的頻率,取放細胞時需佩戴潔凈的手套,并用少量的70%醫(yī)用酒精(過多會導(dǎo)致培養(yǎng)箱中殘留乙醇蒸汽)擦拭培養(yǎng)瓶/皿表面,從而降低細胞培養(yǎng)箱污染的風(fēng)險;
3.定期維護和滅菌,預(yù)防污染
定期清潔維護,培養(yǎng)箱內(nèi)用水滅菌后使用并定期更換,選擇培養(yǎng)箱時,可優(yōu)先考慮有自動滅菌功能的培養(yǎng)箱。細胞房一旦發(fā)生污染,及時進行消毒滅菌工作。